期刊简介

《中华预防医学杂志》创刊于1953年10月1日,创刊时杂志名称为《中华卫生杂志》,1960年与《中华医学杂志》、《医学史与保健组织》合并,改名为《人民保健》;1978年11月25日复刊时更名为《中华预防医学杂志》。本刊是我国预防医学界的高级学术期刊,是学界中历史最悠久的公认的核心期刊。本刊编委会由全国著名的预防医学专家组成,审稿专家涉及预防医学及临床、基础 医学各个领域,他们均是活跃在第一线的学术带头人和学术造诣很高的专家教授,学风严谨、事业心强,是本刊特具权威性的保证。

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  • 杂志名称:中华预防医学杂志
  • 主管单位:中华卫生杂志;人民保健
  • 主办单位:中国科学技术协会
  • 国际刊号:11-2150/R
  • 国内刊号:11-2150/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:获中华医学会华瑞杯编辑规范奖期刊收录:文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 知网收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
中华预防医学杂志2016年第07期

两种胚胎干细胞实验模型评价邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯胚胎发育毒性的比较研究

罗莎;方海琴;杨辉;张立实;贾旭东

关键词:二乙基己基邻苯二甲酸, 胚胎干细胞, 小鼠胚胎干细胞实验, 人胚胎干细胞实验, 胚胎发育毒性评价
摘要:目的:建立并应用小鼠胚胎干细胞实验(mEST)模型与人胚胎干细胞实验(hEST)模型评价邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)的胚胎发育毒性。方法参照欧洲替代方法研究中心(ECVAM)的标准操作方法,建立mEST、hEST模型,并选用ECVAM推荐的已知强胚胎发育毒性物质5-氟尿嘧啶(5-FU)和无胚胎毒性物质青霉素G(PN-G)进行模型验证,在模型验证有效的基础上,以15.6、31.2、62.5、125.0、250.0、500.0、1000.0μg/ml 浓度的DEHP分别染毒小鼠胚胎干细胞D3(mESC-D3)、Balb/c小鼠成纤维细胞3T3(3T3)及人胚胎干细胞H9(hESC-H9)7 d,采用CCK-8法检测不同浓度DEHP染毒后mESC-D3、3T3及hESC-H9细胞存活百分数和半数增殖抑制浓度(IC50)。根据细胞毒性实验结果,使用15.6、31.2、62.5、125.0、250.0、500.0μg/ml 浓度的DEHP分别处理分化的mESC-D3、hESC-H9细胞10 d,采用Real-time PCR检测不同浓度DEHP作用下,分化标志基因心肌细胞肌球蛋白重链(α-MHC)的表达情况,拟合效应曲线,得出半数分化抑制浓度(ID50)。并将ID50、IC50代入线性判别函数公式进行计算与比较。结果细胞生长状态良好,免疫荧光染色可见未分化hESC-H9细胞高表达、干性关键转录因子八聚体结合转录因子(OCT4)、阶段特异性胚胎抗原(SSEA-4)及肿瘤排斥抗原(Tra-1-60),细胞处于未分化状态。拟胚体大小均一、形态一致,可重复性高。采用ECVAM推荐已知发育毒性物质(5-FU和PN-G)对模型进行验证,所建模型有效,可用于受试物胚胎发育毒性的评价。DEHP对mESC-D3的IC50为210.0μg/ml、ID50为246.8μg/ml及对3T3的IC50为197.3μg/ml,代入线性判别函数公式得出函数Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ值分别为7.78、7.58、-7.79,因Ⅰ>Ⅱ>Ⅲ,mEST模型评价DEHP为无胚胎发育毒性。DEHP对hESC-H9的IC50为184.8μg/ml,ID50为84.3μg/ml及对3T3的IC50为195.4μg/ml,代入线性判别函数公式得出函数Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ值分别为3.21、5.77、-6.46,因Ⅱ>Ⅰ>Ⅲ, hEST模型评价DEHP为弱胚胎发育毒性。结论 hEST模型相对于mEST模型在评价受试物的弱胚胎发育毒性方面可能更为敏感。